• lab-217043_1280

Metoda uklanjanja ostataka stanica

Postoji mnogo staničnih fragmenata nakon mehaničke lize stanične suspenzije.Kako ukloniti te fragmente?Pogledajmo različite pristupe:

1. Koristite metodu razrjeđivanja.Kada se stanice razrijede, mogu se razmnožavati, postajat će sve brojnije, a staničnih ostataka bit će sve manje i manje.
2. Postoji i prirodno naseljavanje.Stanice se talože brže od većine fragmenata: : Premjestite staničnu suspenziju ucijev centrifuge, a kada većina stanica potone, gornja otopina se može usisati, a zatim dodati u otopinu kulture kako bi se stanice suspendirale.Ova metoda se može koristiti više puta, a svaki put pod mikroskopom možete promatrati zadovoljava li vaše zahtjeve.
3. Centrifuga niske brzinemože ukloniti ostatke, općenito 700 g, 5 min
4. Kod centrifugiranja, pod uvjetom da je broj stanica dovoljan, smanjite vrijeme centrifugiranja, npr. 5min, 1000rpm, umjesto 3min, 1000rpm, i uklonite supernatant, jer su nekroze i krhotine uglavnom u supernatantu!Ovu operaciju treba izvesti samo jednom tijekom procesa pranja prije inkubacije!

Iako postoji mnogo načina za uklanjanje ostataka stanica, ustanovit ćete da je centrifugiranje jedna od najučinkovitijih metoda!

450

A budući da biljna tkiva i stanice imaju stanične stijenke sastavljene od celuloze, hemiceluloze i pektina, općenito je potrebno samljeti kvarcni pijesak ili stakleni prah odgovarajućom otopinom za ekstrakciju ili tretirati celulazom kako bi se postigla svrha.Fragmentacija bakterijske stanice je teža, jer je cijeli kostur bakterijske stanične stijenke zapravo kovalentna veza peptidoglikanskih cističnih makromolekula, vrlo čvrsta.Uobičajene metode razbijanja bakterijskih staničnih stijenki uključuju ultrazvučno drobljenje, mljevenje pijeska, ekstruziju pod visokim pritiskom ili obradu lizozimom.Nakon što su tkivo i stanice razbijeni, odabire se odgovarajući pufer za ekstrakciju željenog proteina.Netopljivi materijali poput staničnih fragmenata uklanjaju secentrifugaodnosno filtracije.

kontaktirajte Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Vrijeme objave: 24. srpnja 2023